色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。
液相色譜柱具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點(diǎn)但不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床分析。
色譜填料選擇的正確與否會(huì)直接影響到專業(yè)的液相色譜柱分離物質(zhì)效果的好壞。由于液相色譜填料具有相當(dāng)寬的選擇范圍,所以我們?cè)谫徺I之前有必要對(duì)不同液相色譜填料進(jìn)行一個(gè)簡單的認(rèn)識(shí)和了解。
1、正相色譜硅膠基質(zhì)填料
正相色譜柱的固定相是由硅膠和其他具有極性官能團(tuán)組成的鍵合相填料。其物質(zhì)分離特點(diǎn)是極性較弱組合先被色譜柱沖洗出來。而且正相色譜所使用的流動(dòng)相其極性要低于固定相,流動(dòng)相通常使用正乙烷和二氯甲烷等。
2、反相色譜硅膠基質(zhì)填料
反向色譜柱的填料是以硅膠材料為主要物質(zhì),并與極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)組成的鍵合相。其物質(zhì)分離特點(diǎn)是極性較強(qiáng)組合最先被色譜柱沖洗出來,而極性弱的組分則會(huì)更強(qiáng)的保留在柱子上。反向色譜的流動(dòng)相的極性相對(duì)較強(qiáng),常配制有機(jī)緩沖液作為流動(dòng)相。目前較為常用的反相色譜填料有C4(B)、C8(MOS)以及C18(ODS)等。
3、聚合物填料
這種聚合物的填料一般是由聚甲基丙酸酯或者聚苯乙烯-二乙烯基苯組成。其特點(diǎn)是這種色譜柱的酸堿度適用范圍相對(duì)較廣,且疏水性很強(qiáng),但它的柱效相對(duì)于硅膠基質(zhì)的填料要低一些。一般將這種大孔的基質(zhì)填料用于蛋白質(zhì)的分離。
4、其他無機(jī)填料
如石墨化碳對(duì)于酸堿度和溫度沒用嚴(yán)格的限制范圍,一般可對(duì)一些幾何導(dǎo)構(gòu)體進(jìn)行分離。此外還有氧化鋁以及氧化鋯等無機(jī)填料的應(yīng)用。
總而言之,如果我們能夠全面系統(tǒng)的了解一下液相色譜柱填料的分類及特點(diǎn),那么我們?cè)谶x擇購買色譜柱時(shí)就可以在一個(gè)相對(duì)較小的范圍內(nèi)順利找到自己所需要的產(chǎn)品。這樣我們就可以在節(jié)省選擇購買時(shí)間的同時(shí),也能快速買到令自己滿意的色譜柱。